液相色譜柱是高效液相色譜儀(HPLC)的核心分離組件，其性能直接影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性與重復(fù)性。當(dāng)出現(xiàn)峰形異常、柱壓升高、理論塔板數(shù)下降或固定相流失等情況時(shí)，需及時(shí)更換色譜柱。以下是規(guī)范的更換流程及關(guān)鍵注意事項(xiàng)：

　　一、前期準(zhǔn)備

　　安全防護(hù)

　　佩戴防護(hù)手套、護(hù)目鏡及實(shí)驗(yàn)服，避免接觸有機(jī)溶劑與尖銳部件。

　　關(guān)閉儀器電源并釋放系統(tǒng)壓力，防止高壓流體噴濺。

　　工具與材料

　　新色譜柱(型號(hào)/尺寸與原柱一致)、兩通連接器、扳手、密封墊片(PEEK材質(zhì)優(yōu)先)。

　　備用管路配件(若需調(diào)整長(zhǎng)度)。

　　查閱儀器說(shuō)明書及色譜柱技術(shù)參數(shù)表。

　　系統(tǒng)狀態(tài)確認(rèn)

　　停止當(dāng)前運(yùn)行程序，切換至純流動(dòng)相(如甲醇/乙腈)，以低流速(0.5-1mL/min)持續(xù)沖洗至少30分鐘，清除管道內(nèi)殘留樣品。

　　斷開檢測(cè)器信號(hào)線，標(biāo)記進(jìn)出管路接口位置。

　　二、舊柱拆卸步驟

　　定位色譜柱模塊

　　找到柱溫箱內(nèi)的色譜柱支架，觀察管路連接順序(通常為：進(jìn)樣閥→色譜柱→檢測(cè)器)。

　　逐步卸除舊柱

　　用扳手松開兩端螺母，先拆除出口端(靠近檢測(cè)器一側(cè))，緩慢放出殘余液體至廢液瓶。

　　等待片刻使系統(tǒng)泄壓后，再拆卸入口端。

　　禁止強(qiáng)行拉扯管路，以防損壞接頭螺紋。

　　清理接口與評(píng)估磨損

　　檢查篩板是否堵塞或變形，必要時(shí)用超聲波清洗。

　　記錄舊柱序列號(hào)、使用時(shí)長(zhǎng)及故障特征，供后續(xù)選型參考。

　　三、新柱安裝要點(diǎn)

　　方向校驗(yàn)

　　所有色譜柱均有明確流向標(biāo)識(shí)(箭頭指向出口)，反向安裝會(huì)導(dǎo)致填料塌陷。

　　部分反相柱頭尾均可使用，但正相/離子交換柱必須嚴(yán)格遵循方向。

　　無(wú)氣泡安裝

　　采用“液下對(duì)接法”：將新柱入口浸入裝有流動(dòng)相的燒杯中，邊排氣邊連接管路。

　　開啟泵以極低流速(0.2mL/min)灌注，直至出口無(wú)氣泡排出。

　　扭矩控制

　　使用專用扳手按對(duì)角線交替旋緊螺母，力度適中(手感微阻即可)，過(guò)度擰緊可能導(dǎo)致柱床壓縮。

　　建議安裝后運(yùn)行期間定期檢查松動(dòng)情況。

　　四、系統(tǒng)重啟與平衡

　　初始沖洗

　　以初始流動(dòng)相組成(同比例混合)低流速?zèng)_洗60分鐘，觀察柱壓穩(wěn)定性。

　　若柱壓異常偏高，可暫停并用異丙醇短時(shí)沖洗疏通。

　　梯度平衡

　　執(zhí)行空白梯度程序，監(jiān)測(cè)基線漂移量應(yīng)<±0.5mAU。

　　進(jìn)樣測(cè)試混合物驗(yàn)證分離度，對(duì)比理論塔板數(shù)是否達(dá)標(biāo)(N≥80%理論值)。

　　數(shù)據(jù)校準(zhǔn)

　　更新工作站方法文件中的色譜柱信息，重新建立保留時(shí)間對(duì)照表。

　　保存新柱認(rèn)證報(bào)告，包括柱效測(cè)試圖譜及壓力曲線。

　　通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化操作可最大限度延長(zhǎng)色譜柱壽命，典型反相柱使用壽命可達(dá)500-1000次進(jìn)樣。日常維護(hù)建議每周進(jìn)行簡(jiǎn)單沖洗，每月深度再生保養(yǎng)。